ABSTRACT
Abstract The present study evaluated the influence of carvacrol, terpinene-4-ol, and chlorhexidine on the physical-chemical properties of titanium surfaces, cell viability, proliferation, adhesion, and spreading of fibroblasts and osteoblasts in vitro. Titanium surfaces (Ti) were treated with Carvacrol (Cvc), Terpinen-4-ol (T4ol), Chlorhexidine (CHX), DMSO, and ultrapure water (Control group). Physical-chemical modifications were evaluated by surface wettability, the surface free energy (SFE) calculated from the contact angle values using the Owens-Wendt-Rabel-Kaeble (OWRK) equation, scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersive spectrometry probe (EDS) system. Cells were seeded onto Ti-treated surfaces and incubated for 24 h and 72 h, then evaluated by Alamar blue assay and fluorescence microscopy. Surfaces treated with Cvc and T4ol showed the presence of Na, O, and Cl. All surfaces showed hydrophilic characteristics and SFE values between 5.5 mN/m and 3.4 mN/m. On the other hand, EDS peaks demonstrated the presence of O and Cl after CHX treatment. A reduction of cell viability and adhesion was noted on titanium surfaces treated with CHX after 24 and 72h. In conclusion, the results indicate that the decontamination with Cvc and T4ol on Ti surfaces does not alter the surface proprieties and allows an adequate interaction with cells involved in the re-osseointegration process such as fibroblasts and osteoblasts.
Resumo O presente estudo avaliou a influência do carvacrol, terpineno-4-ol e clorexidina nas propriedades físico-químicas de superfícies de titânio, viabilidade celular, proliferação, adesão e esplhamento de fibroblastos e osteoblastos in vitro. Superfícies de titânio (Ti) foram tratadas com Carvacrol (Cvc), Terpinen-4-ol (T4ol), Clorexidina (CHX), DMSO e água ultrapura (Grupo Controle). As modificações físico-químicas foram avaliadas pela molhabilidade da superfície, a energia livre de superfície (ELS) calculada a partir dos valores do ângulo de contato usando a equação de Owens-Wendt-Rabel-Kaeble (OWRK), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia de raios X por energia dispersiva (EDS). As células foram semeadas em superfícies tratadas com Ti e incubadas por 24 h e 72 h, e avaliadas pelo ensaio Alamar blue e microscopia de fluorescência. As superfícies tratadas com Cvc e T4ol mostraram a presença de Na, O e Cl. Todas as superfícies apresentaram características hidrofílicas e valores de ELS entre 5,5 mN/m e 3,4 mN/m. Por outro lado, os picos de EDS demonstraram a presença de O e Cl após o tratamento com CHX. Uma redução da viabilidade celular e adesão foi observada em superfícies de titânio tratadas com CHX após 24 e 72h. Em conclusão, os resultados indicam que a descontaminação com Cvc e T4ol em superfícies de Ti não altera as propriedades da superfície e permite uma interação adequada com células envolvidas no processo de reosseointegração como fibroblastos e osteoblastos.
ABSTRACT
Abstract This study evaluated the antimicrobial capacity of BlueM® mouthwash against the bacterium Streptococcus mutans and its influence on gbpA gene expression as well as its cytotoxic effect on fibroblast cells. BlueM® showed antimicrobial activity, with MIC and MBC values of 0.005% and 0.01%, respectively. The MBIC was 6.25% for S. mutans. CFU count and confocal microscopy revealed significant effect of BlueM® on S. mutans biofilm pre-formed on dentin surfaces. Interestingly, the analysis of gbpA gene expression indicated a decrease in gene expression after 15 min of treatment with BlueM® at a concentration of 25%. Moreover, BlueM® exhibited low levels of cytotoxicity. In conclusion, our results showed the antimicrobial effectiveness of BlueM® against S. mutans, its ability to modulate the expression of the gbpA gene and its low cytotoxicity. This study supports the therapeutic potential of BlueM® as an alternative agent for the control of oral biofilm.
Resumo Este estudo avaliou a capacidade antimicrobiana do enxaguatório BlueM® contra a bactéria Streptococcus mutans e sua influência na expressão do gene gbpA, bem como seu efeito citotóxico em células de fibroblastos. BlueM® apresentou atividade antimicrobiana, com valores de CIM e CBM de 0,005% e 0,01%, respectivamente. O MBIC foi de 6,25% para S. mutans. A contagem de UFC e a microscopia confocal revelaram efeito significativo do BlueM® no biofilme de S. mutans pré-formado nas superfícies de dentinas. Curiosamente, a análise da expressão do gene gbpA, indicou uma diminuição na expressão do gene após 15 min de tratamento com BlueM® na concentração de 25%. Além disso, BlueM® exibiu baixos níveis de citotoxicidade. Em conclusão, nossos resultados mostraram a eficácia antimicrobiana do BlueM® contra S. mutans, sua capacidade de modular a expressão do gene gbpA e sua baixa citotoxicidade. Este estudo apoia o potencial terapêutico do BlueM® como agente alternativo para o controle do biofilme oral.
ABSTRACT
O estudo de filmes de Carbono tipo Diamante é objeto de pesquisas devido às suas diferentes propriedades incluindo propriedades antibacterianas. No tratamento reabilitador com implantes, podem ocorrer complicações, proporcionando a infiltração de microrganismos orais para a interface Implante-Componente protético. O objetivo deste estudo foi avaliar propriedades de molhabilidade e energia livre de superfície a partir dos valores do ângulo de contato; propriedades antimicrobiana, de bioadesão e citotoxicidade de discos de titânio recobertos com DLC. Escherichia coli foi mantida em meio BHI a 37ºC por 3 h e 24 h para teste antimicrobiano. Para adesão, os discos foram mantidos em cultura de E. coli por 90 minutos a 37ºC e 20 minutos em ultrassom. A capacidade de prevenção na migração de bactérias para o interior da interface Implante-Componente protético foi realizado em implantes Hexágono Externo, conectados com torque de 32N e deixados em contato com E. coli por 24h, e Reação em Cadeia da Polimerase semi-quantitativo foi realizado para confirmação da esterilidade da técnica. Foram quantificados em UFC/mL em BHI Ágar para o teste antimicrobiano, adesão e infiltração bacteriana. Para citotoxicidade foi utilizado queratinócitos humanos (HaCat) cultivados em meio DMEM mantidos em atmosfera com 5% de CO2 a 37°C e avaliados pelo teste colorimétrico MTT. Os resultados de molhabilidade, teste antimicrobiano, teste de adesão e Infiltração bacteriana não apresentaram diferença estatisticamente significante entre os grupos. As superfícies de titânio e recobertas com DLC apresentaram uma leve diminuição na viabilidade celular com diferença estatisticamente significante ao grupo controle. O DLC apresenta-se como material biocompatível com leve grau de citotoxicidade que não modifica as propriedades de superfície, não apresenta propriedades antimicrobianas, não interfere na adesão bacteriana de E. coli e não inibem a infiltração bacteriana na interface implante-componente protético
The study of DLC films is the subject of research due to their different properties including antibacterial properties. Rehabilitator in implant treatment, complications may occur, providing the infiltration of oral microorganisms for implant- abutmente interface. The aim of this study was to evaluate properties and wetting surface free energy from the values of the contact angle; antimicrobial properties bioadhesion and cytotoxicity of titanium discs coated with DLC. Escherichia coli was maintained on BHI at 37 ° C for 3 h and 24 h for antimicrobial test. For adhesion test, the discs were maintained in culture of E. coli for 90 minutes at 37 ° C and 20 minutes inside ultrasound. The ability to prevent the migration of bacteria into the implant - abutment interface was performed in dental implants External Hexagon connected with a torque of 32N and left in contact with E. coli for 24 h , and Polymerase Chain Reaction semi -quantitative was performed to confirm the sterility of the technique. Were quantified in CFU / ml in BHI agar for antimicrobial test, bacterial adhesion and infiltration. Cytotoxicity was performed using human keratinocytes ( HaCaT ) cultured in DMEM maintained in an atmosphere of 5% CO2 at 37 ° C and evaluated by the MTT colorimetric assay. The results of wettability, antimicrobial test, adhesion test and bacterial infiltration showed no statistically significant difference between the test groups. The surfaces of titanium and coated with DLC showed a slight decrease in cell viability with a statistically significant difference to the control group. The DLC is presented as biocompatible material with mild cytotoxicity without changing the surface properties, has no antimicrobial properties, does not interfere with bacterial adherence for E. coli and do not inhibit bacterial infiltration into the implant-abutment interface